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人流行性腮腺炎病毒抗體ELISA試劑盒直銷
點擊次數:980 更新時間:2017-03-08

抗Ⅲ抗體Elisa試劑盒實驗原理

本試劑盒應用雙抗原夾心法測定標本中人流行性腮腺炎病毒抗體(Mumps-Ab)表達。用純化的抗原包被微孔板,制成固相抗原,可與樣品中流行性腮腺炎病毒抗體(Mumps-Ab)相結合,經洗滌除去未結合的抗原和其他成分后再與HRP標記的抗原結合,形成抗原-抗體-酶標抗原復合物,經過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成zui終的黃色。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),與CUTOFF值相比較,從而判定標本中流行性腮腺炎病毒抗體(Mumps-Ab)的存在與否。

人流行性腮腺炎病毒抗體ELISA試劑盒組成

130倍濃縮洗滌液20ml×1瓶7終止液6ml×1瓶

2酶標試劑6ml×1瓶8陽性對照0.5ml×1瓶

3酶標包被板12孔×8條9陰性對照0.5ml×1瓶

4樣品稀釋液6ml×1瓶10說明書1份

5顯色劑A液6ml×1瓶11封板膜2張

6顯色劑B液6ml×1/瓶12密封袋1個

抗Ⅲ抗體Elisa試劑盒標本要求

1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融

2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。

人流行性腮腺炎病毒抗體(Mumps-Ab)ELISA試劑盒操作步驟

1.編號:將樣品對應微孔按序編號,每板應設陰性對照2孔、陽性對照2孔、空白對照1孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)

2.加樣:分別在陰、陽性對照孔中加入陰性對照、陽性對照50μl。然后在待測樣品孔先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,

3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。

4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用

5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。

6.加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。

7.溫育:操作同3。

8.洗滌:操作同5。

9.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.

10.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。

11.測定:以空白空調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。測定應在加終止液后15分鐘以內進行。

抗Ⅲ抗體Elisa試劑盒計算和結果判定:

試驗有效性:陽性對照孔平均值≥1.00;陰性對照平均值≤0.10

臨界值(CUTOFF)計算:臨界值=陰性對照孔平均值+0.15

陰性判定:樣品OD值<臨界值(CUTOFF)者為流行性腮腺炎病毒抗體(Mumps-Ab)陰性

陽性判定:樣品OD值≥臨界值(CUTOFF)者為流行性腮腺炎病毒抗體(Mumps-Ab)陽性。

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