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細(xì)胞簡介：

集合管是由皮質(zhì)走向髓質(zhì)椎體孔的小管，沿途有許多腎單位的遠(yuǎn)曲小管與之相連，管徑逐漸變粗，管壁逐漸變厚，管壁由柱狀上皮構(gòu)成。

集合管流的是小管液，腎臟血液經(jīng)腎小球?yàn)V過，形成的原尿，進(jìn)入腎小管后就稱為小管液，小管液流向集合管進(jìn)一步濾過和重吸收形成終尿。

細(xì)胞特性：

1） 組織來源于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的正常腎臟組織。

2) 細(xì)胞鑒定：細(xì)胞角蛋白-18（CK-18）熒光染色為陽性。

3) 經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。

4) 不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、、酵母和。

5) 細(xì)胞生長方式：鋪路石狀細(xì)胞，不規(guī)則細(xì)胞，貼壁培養(yǎng)。

推薦培養(yǎng)基：

我們推薦使用 delf原代 上皮 細(xì)胞培養(yǎng)體系 作為該細(xì)胞的培養(yǎng)試劑。

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將組織剪成1mm3左右大小；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；

2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；

5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

公司正在出售的產(chǎn)品：

大鼠白介素35(IL-35)檢測(cè)試劑盒 ，英文名： IL-35 ELISA Kit

Mouse ierleukin 23 (IL-23) ELISA Kit 小鼠白介素23(IL-23)檢測(cè)試劑盒

ELISA 小鼠羥脯(mouse HYP)  進(jìn)口分裝

CLIAKitforINHBPELISAKit大鼠抑制素結(jié)合蛋白

通用型甘油三酯(iglyceride)含量酶連續(xù)循環(huán)反應(yīng)比色法定量檢測(cè)試劑盒50次

ELISAKitPROG大鼠孕激素/孕同

NEK3重組小鼠 NEK3 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽) Protein

層粘連蛋白β1(LAMβ1)重組蛋白 Recombinant Laminin Beta 1 (LAMb1)

TNFSF11重組人 RANKL / OPGL / TNFSF11 / CD254 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

EPHB1 Protein Human 重組人 EphB1 / EPHT2 蛋白

ALCAM Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 ALCAM 蛋白

層粘連蛋白β1(LAMβ1)重組蛋白 Recombinant Laminin Beta 1 (LAMb1)

EPHB1 Protein Human 重組人 EphB1 / EPHT2 蛋白

NEK3重組小鼠 NEK3 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽) Protein

ALCAM Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 ALCAM 蛋白

TNFSF11重組人 RANKL / OPGL / TNFSF11 / CD254 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶4(MMP-4)ELISA 試劑盒 96T/48T

Rat soluble endothelial protein C receptor (sEPCR) ELISA Kit 大鼠可溶性血管內(nèi)皮細(xì)胞蛋白C受體(sEPCR)檢測(cè)試劑盒

HumanpoiculinELISAKit 人膜橋蛋白(poiculin)檢測(cè)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

Humanai-IgAaibody檢測(cè)試劑盒人抗IgA抗體(ai-IgA-Ab)檢測(cè)試劑盒規(guī)格：96T/48T

植物0脂酶D2(PhospholipaseD2)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒20次

HumanVascuoarendothelialcellgrowthfactorreceptor1,VEGFR-1/Flt1ELISAKit人血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子受體1(VEGFR-1/Flt1)檢測(cè)試劑盒規(guī)格：96T/48T

大鼠腎集合管上皮細(xì)胞小鼠白介素檢測(cè)試劑盒   小鼠白介素試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   小鼠白介素試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來源：檢測(cè)試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠白介素試劑盒、小鼠白介素eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

小鼠環(huán)0酸鳥苷檢測(cè)試劑盒   小鼠環(huán)0酸鳥苷試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   小鼠環(huán)0酸鳥苷試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來源：檢測(cè)試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠環(huán)0酸鳥苷試劑盒、小鼠環(huán)0酸鳥苷eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

小鼠骨膠原交聯(lián)檢測(cè)試劑盒   小鼠骨膠原交聯(lián)試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   小鼠骨膠原交聯(lián)試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來源：檢測(cè)試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠骨膠原交聯(lián)試劑盒、小鼠骨膠原交聯(lián)eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

小鼠骨成型蛋白受體檢測(cè)試劑盒   小鼠骨成型蛋白受體試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   小鼠骨成型蛋白受體試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來源：檢測(cè)試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠骨成型蛋白受體試劑盒、小鼠骨成型蛋白受體eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

注意事項(xiàng)：

1. 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，若有上述現(xiàn)象發(fā)生請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系。

2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子等，確保細(xì)胞培養(yǎng)條件一致，若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問題，責(zé)任由客戶自行承擔(dān)。

3. 用75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題，部分細(xì)胞由于溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片，是正常現(xiàn)象。觀察好細(xì)胞狀態(tài)后，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置4-6h。

4. 貼壁細(xì)胞可以消化，懸浮細(xì)胞直接混勻收集細(xì)胞，900 rpm-1000 rpm離心3 min，棄上清。加5 mL PBS重懸細(xì)胞，再900 rpm-1000 rpm離心3 min，，用新鮮的*培養(yǎng)基重懸細(xì)胞，并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中，置于培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。

5. 請(qǐng)客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。

6. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天各拍幾張細(xì)胞照片，記錄細(xì)胞狀態(tài)，便于和我司技術(shù)部溝通交流。由于運(yùn)輸?shù)脑颍瑐€(gè)別敏感細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系，告知細(xì)胞的具體情況，以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。

7. 該細(xì)胞僅供科研使用。

8. 備注：運(yùn)輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來培養(yǎng)細(xì)胞，請(qǐng)換用按照說明書細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的*培養(yǎng)基來培養(yǎng)細(xì)胞。收到細(xì)胞后次傳代建議1：2傳代 。

9.注意： 1:2傳代就是1個(gè)T25瓶傳2個(gè)T25瓶或者2個(gè)6cm皿。不是1個(gè)T25瓶傳2個(gè)10cm皿。