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① 組織塊培養(yǎng)法

組織塊培養(yǎng)是常用、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長(zhǎng)。

② 消化培養(yǎng)法

③ 懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法

對(duì)于懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞，如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

④器官培養(yǎng)

器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性，可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。

產(chǎn)品名稱：小鼠腎近端小管上皮細(xì)胞

英文名稱：Mouse primary renal proximal tubular epithelial cells

組織來源：腎臟組織

產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

細(xì)胞簡(jiǎn)介：

腎單位是腎結(jié)構(gòu)和功能的基本單位，由腎小體和腎小管組成。腎小管與腎小囊壁層相連的一條細(xì)長(zhǎng)上皮性小管，具有重吸收和排泌作用 .腎小管按不同的形態(tài)結(jié)構(gòu)，分布位置和功能分成三部分；近端小管、髓袢和遠(yuǎn)端小管。

近端小管在對(duì)腎小球超濾液中蛋白質(zhì)、 Na+、HCO3-、Cl-、K+、Ca2+、PO43-,水與有機(jī)溶質(zhì)（葡萄糖與氨基酸）的重吸收中發(fā)揮著重要作用，約1/2的超濾液在近端小管處重吸收。

細(xì)胞特性：

1）組織來源于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的正常腎臟組織。

2)細(xì)胞鑒定：細(xì)胞角蛋白-18（CK-18）熒光染色為陽性。

3)經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。

4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、、酵母和。

5)細(xì)胞生長(zhǎng)方式：鋪路石狀細(xì)胞，不規(guī)則細(xì)胞，貼壁培養(yǎng)。

推薦培養(yǎng)基：

我們推薦使用 Delf原代上皮細(xì)胞培養(yǎng)體系 作為體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基。

取材→分離→培養(yǎng)和維持

1、取材

人和動(dòng)物細(xì)胞的取材是原代細(xì)胞培養(yǎng)成功的首要條件，直接影響細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

(1) 取材的基本要求

① 取材要注意新鮮和保鮮

② 應(yīng)嚴(yán)格無菌

③ 防止機(jī)械損傷

④ 去除無用組織和避免干燥

⑤ 應(yīng)注意組織類型、分化程度、年齡等

⑥ 作好記錄

2、分離

人或動(dòng)物體內(nèi)(或胚胎組織)由于多種細(xì)胞結(jié)合緊密，不利于各個(gè)細(xì)胞在體外培養(yǎng)中生長(zhǎng)繁殖，必須將現(xiàn)有的組織塊充分散開，使細(xì)胞解離出來。

(1)懸浮細(xì)胞的分離方法

組織材料若來自血液、羊水、胸水或腹水的懸液材料，的方法是采用1000r/min的低速離心10分鐘。經(jīng)離心后由于各種細(xì)胞的比重不同可在分層液中形成不同層，這樣可根據(jù)需要收獲目的細(xì)胞。

(2)實(shí)體組織材料的分離方法

對(duì)于實(shí)體組織材料，由于細(xì)胞間結(jié)合緊密，為了使組織中的細(xì)胞充分分散，形成細(xì)胞懸液，可采用機(jī)械分散法(物理裂解)和消化分離法。

① 機(jī)械分散法

特點(diǎn):簡(jiǎn)便、快速,但對(duì)組織機(jī)械損傷大，而且細(xì)胞分散效果差,適用于處理纖維成分少的軟組織。

② 消化分離法

組織消化法是把組織剪切成較小團(tuán)塊(或糊狀)，應(yīng)用酶的生化作用和非酶的化學(xué)作用進(jìn)一步使細(xì)胞間的橋連結(jié)構(gòu)松動(dòng)，使團(tuán)塊膨松，由塊狀變成絮狀，此時(shí)再采用機(jī)械法，用吸管吹打分散或電磁攪拌或在搖珠瓶中振蕩，使細(xì)胞團(tuán)塊得以較充分的分散，制成少量細(xì)胞群團(tuán)和大量單個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞懸液，接種培養(yǎng)后，細(xì)胞容易貼壁生長(zhǎng)。

大鼠/離子轉(zhuǎn)運(yùn)ATP酶β3肽(ATP1β3)檢測(cè)試劑盒 ，英文名： ATP1β3 ELISA Kit

Mouse folic acid (FA) ELISA Kit 小鼠(FA)檢測(cè)試劑盒

RatHistoneDeacetylase,HDELISAKit 大鼠組織蛋白去乙?；?span>(HD)檢測(cè)試劑盒 進(jìn)口分裝

CLIAKitforGHRH(Humangrowthhormonereleasinghormone)ELISAKit人促生長(zhǎng)激素釋放激素

細(xì)胞鈣調(diào)神經(jīng)0酸酶(CALCINEURIN;PP2B)活性酶連續(xù)循環(huán)比色法定量檢測(cè)試劑盒20次

Ratsolubleierleukin-1receptorⅠ,IL-1sRⅠELISAKit大鼠白介素1可溶性受體Ⅰ(IL-1sRⅠ)檢測(cè)試劑盒

CDH5重組大鼠 VE-Cadherin / CD144 / CDH5 蛋白  Protein

Elastin 彈性蛋白抗原 0.5mgElastin 彈性蛋白抗原

LTA重組人 TNF-beta / TNFSF1 / Lymphotoxin alpha 蛋白 Protein

FCGR3A Protein Human 重組人 CD16a / FCGR3A 蛋白 (176 Val, His 標(biāo)簽)

ENG Protein Mouse 重組小鼠 Endoglin / CD105 / ENG 蛋白 (His 標(biāo)簽)

Elastin 彈性蛋白抗原 0.5mgElastin 彈性蛋白抗原

FCGR3A Protein Human 重組人 CD16a / FCGR3A 蛋白 (176 Val, His 標(biāo)簽)

CDH5重組大鼠 VE-Cadherin / CD144 / CDH5 蛋白  Protein

ENG Protein Mouse 重組小鼠 Endoglin / CD105 / ENG 蛋白 (His 標(biāo)簽)

LTA重組人 TNF-beta / TNFSF1 / Lymphotoxin alpha 蛋白 Protein

小鼠兒茶酚胺(CA)ELISA 試劑盒

Rat endothelial lipase (EL) ELISA Kit 大鼠內(nèi)皮脂肪酶(EL)檢測(cè)試劑盒

Humanhemoglobin-advancedglycosylationendproducts,Hb-AGEELISAKit 人血紅蛋白晚期糖基化終末產(chǎn)物(Hb-AGE)檢測(cè)試劑盒 進(jìn)口分裝

HumanAquaporin0,AQP-0檢測(cè)試劑盒人水通道蛋白0(AQP-0)檢測(cè)試劑盒

植物乙醇脫氫酶總活性比色法定量檢測(cè)試劑盒20次

Humaissueinhibitorofmetalprotease1，TIMP-1ELISAKit人基質(zhì)金屬蛋白酶組織抑制因子1(TIMP-1)檢測(cè)試劑盒

小鼠腎近端小管上皮細(xì)胞蝦特定基因序列(FC)核酸檢測(cè)試劑盒(PCR-熒光探針法)   48T

蝦特定基因序列(FC)核酸檢測(cè)試劑盒   48T

蟹特定基因序列(Cytb)核酸檢測(cè)試劑盒(PCR-熒光探針法)   48T

蟹特定基因序列(Cytb)核酸檢測(cè)試劑盒   48T

視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。

1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng),如無法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作,凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個(gè)月。

T-25培養(yǎng)瓶充滿培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請(qǐng)鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài),如鋪瓶率超過85%請(qǐng)立即進(jìn)行傳代操作,如懸浮的細(xì)胞較多,請(qǐng)將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。

本公司的所有產(chǎn)品僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)科研等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或治療，非藥用，非食用