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產(chǎn)品名稱：大鼠鼻黏膜上皮細(xì)胞
產(chǎn)品特點(diǎn)：大鼠鼻黏膜上皮細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品293來(lái)源病毒包裝細(xì)胞;ΦA 人上皮細(xì)胞培養(yǎng)基 M-NFS-60 (小鼠白血病細(xì)胞G-CSF依賴性) CD3E Others Human 人 CD3E 人細(xì)胞裂解液 人星形膠質(zhì)細(xì)胞 Human RSPO1 Protein Human 重組人 R-Spondin 1 / RSPO1
產(chǎn)品型號(hào)：
更新日期：2024-12-10
訪問(wèn)次數(shù)：341
大鼠鼻黏膜上皮細(xì)胞的詳細(xì)資料：
實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一、分離與培養(yǎng)：
1、無(wú)菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將組織剪成1mm3左右大小；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織被消化；
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；
2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜；
5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS沖洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
細(xì)胞簡(jiǎn)介：
大鼠鼻黏膜上皮分離自鼻黏膜組織；黏膜是覆蓋在機(jī)體內(nèi)消化、呼吸、泌尿、生殖等器官管腔內(nèi)壁的一層組織結(jié)構(gòu)，由上皮組織和疏松結(jié)締組織構(gòu)成。根據(jù)部位不同，有口腔黏膜、胃腸黏膜、鼻腔黏膜、氣管黏膜、陰道黏膜、眼瞼黏膜等不同名稱。它們的結(jié)構(gòu)也因功能、部位不一而不盡相同。鼻腔黏膜，簡(jiǎn)稱鼻黏膜，覆蓋于鼻腔表面，黏膜下方為軟骨、骨或骨骼肌。根據(jù)結(jié)構(gòu)與功能的不同，鼻黏膜又分為前庭部、呼吸部和嗅部三部分。前庭部是鄰近外鼻孔的部分，有豐富的鼻毛可以阻擋空氣中較大的塵粒吸入。呼吸部占鼻黏膜的大部，有發(fā)達(dá)的上皮纖毛，它們可向咽部擺動(dòng)，黏著有塵粒、細(xì)菌的黏液排向咽部，最終將它們排出體外。此外，此部分有豐富的血管與腺體，對(duì)吸入的空氣有加溫和濕潤(rùn)作用。嗅部黏膜范圍較小，主要位于鼻腔頂部。它含有一種專(zhuān)司嗅覺(jué)的嗅細(xì)胞及嗅腺，它們分泌能溶解到達(dá)嗅區(qū)的含氣味的微粒，刺激嗅細(xì)胞表面上的嗅毛產(chǎn)生嗅覺(jué)，而且還由于嗅細(xì)胞具有不同的受體，可分別接受不同化學(xué)分子的刺激，因此可產(chǎn)生不同的嗅覺(jué)。
產(chǎn)品名稱 | 大鼠鼻黏膜上皮細(xì)胞 | 組織來(lái)源 | 鼻黏膜 |
英文名稱 | Rat Nasal Mucosal Epithelial Cells | 產(chǎn)品規(guī)格 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 |
方法簡(jiǎn)介：
實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠鼻黏膜上皮采用-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法，并通過(guò)上皮細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來(lái)，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè)
實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠鼻黏膜上皮經(jīng)Cytokeratin-18免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息：
包被條件：鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）
培養(yǎng)基：含FBS、EGF、Hydrocortisone、腎上腺素、甲狀腺素、Insulin、Transferrin、Selenium Solution、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率：每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性：貼壁
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
傳代特性：可傳1-2代
消化液：0.25%
培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%
大鼠鼻黏膜上皮體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專(zhuān)用生長(zhǎng)培養(yǎng)基及正確的操作方法來(lái)培養(yǎng)，以此保證該細(xì)胞的好培養(yǎng)狀態(tài)。
注意事項(xiàng)：
1. 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，若有上述現(xiàn)象發(fā)生請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系。
2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說(shuō)明書(shū)，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子等，確保細(xì)胞培養(yǎng)條件一致，若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問(wèn)題，責(zé)任由客戶自行承擔(dān)。
3. 用75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問(wèn)題，部分細(xì)胞由于溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片，是正常現(xiàn)象。觀察好細(xì)胞狀態(tài)后，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置4-6h。
4. 貼壁細(xì)胞可以消化，懸浮細(xì)胞直接混勻收集細(xì)胞，900 rpm-1000 rpm離心3 min，棄上清。加5 mL PBS重懸細(xì)胞，再900 rpm-1000 rpm離心3 min，，用新鮮的*培養(yǎng)基重懸細(xì)胞，并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中，置于培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。
5. 請(qǐng)客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。
6. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天各拍幾張細(xì)胞照片，記錄細(xì)胞狀態(tài)，便于和我司技術(shù)部溝通交流。由于運(yùn)輸?shù)脑颍瑐€(gè)別敏感細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系，告知細(xì)胞的具體情況，以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問(wèn)題解決。
7. 該細(xì)胞僅供科研使用。
8. 備注：運(yùn)輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞，請(qǐng)換用按照說(shuō)明書(shū)細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的*培養(yǎng)基來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞。收到細(xì)胞后次傳代建議1：2傳代 。
9.注意： 1:2傳代就是1個(gè)T25瓶傳2個(gè)T25瓶或者2個(gè)6cm皿。不是1個(gè)T25瓶傳2個(gè)10cm皿。
公司正在出售的產(chǎn)品：
大鼠肌鈣蛋白T(Tn-T)檢測(cè)試劑盒 ，英文名： Tn-T ELISA Kit
Rabbit Bcl-2 associated X protein (BAX) ELISA Kit 兔Bcl-2相關(guān)X蛋白(BAX)檢測(cè)試劑盒
牛(BCV)核酸檢測(cè)試劑盒(PCR-熒光探針?lè)?span>) 48T
CLIAKitforMouseSlit2ELISAKit小鼠Slit2
體液鈣離子濃度比色法定量檢測(cè)試劑盒20次
ELISAKit6-K-PG人6同前列腺素
SFRP2重組小鼠 sFRP2 蛋白 Protein
C-jun/AP-1 (Oncoprotein C-jun：active protein 1 0.5mgC-jun/AP-1 (Oncoprotein C-jun：active protein 1) 原癌基因蛋白(活化蛋白1)(抗原)
APEX1重組人 APEX1 / AP / APEx / Ref-1 蛋白 Protein
CAMK1G Protein Human 重組人 CAMK1G / CLICK III / CaMKIgamma 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽)
MCPT1 Protein Mouse 重組小鼠 MCPT1 蛋白
C-jun/AP-1 (Oncoprotein C-jun：active protein 1 0.5mgC-jun/AP-1 (Oncoprotein C-jun：active protein 1) 原癌基因蛋白(活化蛋白1)(抗原)
CAMK1G Protein Human 重組人 CAMK1G / CLICK III / CaMKIgamma 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽)
SFRP2重組小鼠 sFRP2 蛋白 Protein
MCPT1 Protein Mouse 重組小鼠 MCPT1 蛋白
APEX1重組人 APEX1 / AP / APEx / Ref-1 蛋白 Protein
鴨胱天蛋白酶9(Casp-9)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human ai hCG aibody (AhCGAb) ELISA Kit 人抗人絨毛膜抗體(AhCGAb)檢測(cè)試劑盒
HumanMotilin,MTLELISAKit 人胃動(dòng)素(MTL)檢測(cè)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforAcSDKPELISAKit大鼠N-乙酰基-絲氨酰-天門(mén)冬酰-賴氨酰-脯
血影細(xì)胞膜熒光染色試劑盒20次
Mouseplateletfactor3,PF3ELISAKit小鼠血小板因子3(PF-3)檢測(cè)試劑盒規(guī)格：96T/48T
大鼠鼻黏膜上皮細(xì)胞（NO）測(cè)定試劑盒（還原酶法）
超氧化物歧化酶（SOD）分型測(cè)試盒（羥胺法）
微量二（MDA）測(cè)定試劑盒（TBA法）
—S轉(zhuǎn)移酶（GSH-ST）試劑盒（比色法）
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