產(chǎn)品名稱：兔表皮角化上皮細胞
產(chǎn)品特點：兔表皮角化上皮細胞公司正在出售的產(chǎn)品RAW 264.7(小鼠單核巨噬細胞白血病細胞) tTA基因修飾的小鼠胰腺癌細胞(B類);Pan02-CAG-tTA-4B3(含10mL酶解緩沖液) 1mL 大鼠腎系膜細胞;RMC HeLa人細胞 Human cervix cancer HeLa
產(chǎn)品型號：
更新日期：2024-12-12
訪問次數(shù)：264
兔表皮角化上皮細胞的詳細資料：
實驗報告：
一、分離與培養(yǎng)：
1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將組織剪成1mm3左右大小；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織被消化；
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；
2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；
5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS沖洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
細胞簡介：
兔表皮角化分離自皮膚組織；表皮位于動物皮膚的外層，由胚胎時期外胚層形成，具有抗摩擦和抗損傷的作用。表皮是皮膚的淺層結(jié)構(gòu)，由復(fù)層扁平上皮構(gòu)成。從基底層到表面可分為五層，即基底層、棘層、顆粒層、透明層和角質(zhì)層。表皮角化細胞（KC）是構(gòu)成表皮的主要細胞成分，在體內(nèi)處于不斷增殖過程中，分裂的角化細胞主要位于其基底層，少數(shù)位于棘細胞層。隨著向表層的推移，細胞的分化程度逐漸增加，并喪失分裂活性。
產(chǎn)品名稱 | 兔表皮角化上皮細胞 | 組織來源 | 皮膚 |
英文名稱 | Rabbit Epidermal keratinized epithelial Cells | 產(chǎn)品規(guī)格 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 |
方法簡介：
實驗室分離的兔表皮角化上皮先消化、后-膠原酶混合消化法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測
實驗室分離的兔表皮角化上皮經(jīng)PCK免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息：
包被條件：鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）
培養(yǎng)基：含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率：每2-3天換液一次
生長特性：貼壁
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
傳代特性：可傳1-3代左右；2代以內(nèi)狀態(tài)佳
消化液：0.25%
培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%
兔表皮角化上皮體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。
注意事項：
1. 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時和我們聯(lián)系。
2. 仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關(guān)信息，如細胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子等，確保細胞培養(yǎng)條件一致，若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細胞出現(xiàn)問題，責(zé)任由客戶自行承擔(dān)。
3. 用75%酒精擦拭細胞瓶表面，顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題，部分細胞由于溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片，是正常現(xiàn)象。觀察好細胞狀態(tài)后，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置4-6h。
4. 貼壁細胞可以消化，懸浮細胞直接混勻收集細胞，900 rpm-1000 rpm離心3 min，棄上清。加5 mL PBS重懸細胞，再900 rpm-1000 rpm離心3 min，，用新鮮的*培養(yǎng)基重懸細胞，并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中，置于培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。
5. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細胞培養(yǎng)。
6. 建議客戶收到細胞后前3天各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態(tài)，便于和我司技術(shù)部溝通交流。由于運輸?shù)脑颍瑐€別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請及時和我們聯(lián)系，告知細胞的具體情況，以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。
7. 該細胞僅供科研使用。
8. 備注：運輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來培養(yǎng)細胞，請換用按照說明書細胞培養(yǎng)條件新配制的*培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞。收到細胞后次傳代建議1：2傳代 。
9.注意： 1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿。不是1個T25瓶傳2個10cm皿。
公司正在出售的產(chǎn)品：
兔子層連蛋白/板層素(LN)ELISA 試劑盒
Human vascular endothelial cell growth factor C (VEGF-C) ELISA Kit 人血管內(nèi)皮細胞生長因子C(VEGF-C)檢測試劑盒
Humanai-gangliosideaibody,GM1ELISAKit 人抗抗體(GM1)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝
HumanErythropoietin,EPO檢測試劑盒人紅細胞生成素(EPO)檢測試劑盒規(guī)格：96T/48T
組織RSK3激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次
HumanOsteogenicGrowthPeptide，OGPELISAKit人成骨生長肽(OGP)檢測試劑盒規(guī)格：96T/48T
CD86重組大鼠 CD86 / B7-2 蛋白 Protein
HIV gp120 艾滋病病毒(抗原 0.5mgHIV gp120 艾滋病病毒(抗原)
HSPD1重組人 HSPD1 / HSP60 蛋白 (His & GST 標簽) Protein
IL27 Protein Human 重組人 IL27 / Interleukin-27 蛋白
HDAC8 Protein Mouse 重組小鼠 HDAC8 / HDACL1 蛋白
HIV gp120 艾滋病病毒(抗原 0.5mgHIV gp120 艾滋病病毒(抗原)
IL27 Protein Human 重組人 IL27 / Interleukin-27 蛋白
CD86重組大鼠 CD86 / B7-2 蛋白 Protein
HDAC8 Protein Mouse 重組小鼠 HDAC8 / HDACL1 蛋白
HSPD1重組人 HSPD1 / HSP60 蛋白 (His & GST 標簽) Protein
豚鼠干擾素α(IFNα)檢測試劑盒 ，英文名： IFNα ELISA Kit
Calcium channel aibody (VGCC) ELISA Kit 人鈣離子通道抗體(VGCC)檢測試劑盒
RabbitCoisolELISAKit 兔子(Coisol)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitforBA(HumanBlockingaibody)ELISAKit人封閉抗體
線蟲基因組DNA分離試劑盒20次
Rabbitbonemorphogeneticproteins,BMPsELISAKit兔骨形成蛋白(BMPs)檢測試劑盒規(guī)格：96T/48T
兔表皮角化上皮細胞人轉(zhuǎn)鐵蛋白（F）檢測試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人轉(zhuǎn)錄因子抗體-1(ATF-1)檢測試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人轉(zhuǎn)甲狀腺素蛋白(T)檢測試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人轉(zhuǎn)化生長因子β2(TGFβ2)檢測試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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